微生物的人工培养指根据微生物生长繁殖的营养要求及环境要求,由人工提供各种适宜条件而获得所需的微生物。微生物的人工培养应用广泛,凡是与微生物相关的生产、科研活动,如微生物研究、微生物分离鉴定、传染病诊断、利用微生物生产各类产品等,均需要人工培养微生物。
微生物的生长繁殖会受到营养、pH值、温度及气体等因素的影响,因此,人工培养微生物需要给微生物提供相应的适宜条件。培养基是人工配制的、适合微生物生长繁殖及积累代谢产物的营养基质。培养基必备的条件主要有:
1.合适的营养物质。微生物的生长繁殖需要营养,不同类型的微生物对营养的需求差别很大,即便是同一微生物,在不同生理生化过程中对营养的需求也不尽相同。实际工作中应根据微生物营养特点和培养目的配制适宜的培养基。除了考虑营养物质种类,还要注意培养基中各种物质的浓度及比例。
2.适宜的pH值。不同微生物生长繁殖或合成代谢产物的最适宜pH值各不相同,为此常在培养基中添加酸碱缓冲剂,有些培养基自身的某些组分如氨基酸、蛋白胨也可起到酸碱缓冲剂的作用。
3.适当的物理状态。根据使用目的不同,培养基中可添加不同含量的凝固剂,配制成固体、半固体或液体等物理状态。
4.经灭菌处理后方可使用。制备培养基的营养组分并非无菌物质,其本身即含许多微生物,培养基制备过程也会带来微生物的污染。因此,配好的培养基应立即进行灭菌处理,使其保持无菌状态,使用时才能避免杂菌污染,不干扰目的菌株的正常培养。
此外,培养基还要考虑渗透压、氧化还原电势和水活度等诸多影响因素。
培养基种类繁多,根据培养基成分来源的不同可分为:
1.天然培养基。指含有天然物质或天然物质经人工降解所得产物的培养基。含有纯天然成分,对其中的组分不甚清楚或各组分的含量具有不恒定性,适用于实验室一般增菌培养及大规模的工业发酵。
2.合成培养基。指用化学成分及含量完全明确的物质组成的培养基,又称组合培养基。其优点是组分清楚、含量确定、重现性好,但成本较高、配制麻烦,微生物在其中生长较慢,适用于微生物营养、代谢、分类鉴定、遗传育种等方面的研究工作。